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紫外可见分光光度计杂散光测试步骤 光度计如何操作

时间:2020-07-10    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     

  据了解,有的紫外可见分光光度计只测试220nm处的杂散光,不测试340nm处的杂散光,这样是不正确的,需测试220nm处杂散光是因为:①根据量子光学理论,波长是能量的倒数,波长短能量大,容易产生杂散光,而220nm处属于短波部分;②根据仪器学理论中的电光源理论,氘灯在220nm处能量很小,即信号很小,容易显现杂散光;③根据仪器学理论中的光电发射理论,光电倍增管在220nm处的光谱响应(灵敏度)低,容易显现杂散光。而测试340nm处杂散光的原因是完全不同的,因为340nm处一般是氘灯换钨灯和仪器调换滤光片的地方,此时容易产生杂散光。所以,对于紫外可见分光光度计来讲,应该测试220nm和340nm两处的杂散光。
 

  紫外可见分光光度计杂散光测试步骤:
 

  1、首先将参比液注入配对石英石吸收池,分别放置在参比池座和试样池座内。再测定波段扫描基线并使之平滑。
 

  2、将减光片插入试样光路的滤光片槽内,其读数即为减光片的衰减值K,然后将减光片插入参比光路的滤光片座内,
 

  3、将石英吸收池中的蒸馏水依次换成上述截止滤光液,插入试样试样池座中,在相应的波段内扫描、打印;在记录纸的作标上量取测定波长处的透光度,乘以衰减值K,即得各测定波长处的杂散光值。
 

紫外可见分光光度计使用说明

 

    紫外可见分光光度计来自于美国,产品包含光源,单色器,吸收池,检测器和显 示器等,它是一款对物质进行定性,定量以及结构分析的仪器。这款仪器和人们常 用的可见光光度计有有很大的区别,除了波长范围,使用光源都不一样等,价格也 是后者要要贵一些;平时的使用和注意事项不一样的,今天就先来学习一下紫外可见分光光度计使用方法:    1.试验中所用的量瓶、移液管均应经检定校正、洗净后使用。    2.使用的石英吸收池必须洁净。用于盛装样品、参比及空内溶液的吸收池,当装 入同一溶剂时,在规定波长测定吸收池的透光率,如透光率相差在0.3%以下者可配 对使用,否则必须加以校正。    3.取吸收池时,手指拿毛玻璃面的两侧。装盛样品溶液以池休积的4/5为度,使用 挥发性溶液吋应加盖,透光面要用擦镜纸由上而下擦拭干净,检视应无残留溶剂。 为防止溶剂挥发后溶质残留在池子的透光面,可先用蘸有空白溶剂的擦镜纸擦拭, 然后再用干擦镜纸拭净。吸收池放入样品室时应注意每次放入方向相同。使用后用 洗液及水冲洗干净,晾干防尘保存,吸收池发现污染不易洗净时可用硫酸发烟硝酸(3 :1V/V)混合液稍加浸泡后,洗净备用。如用重铬酸钾清洁液清洗时,吸收池不贫在 清洁液中长时间浸泡,否则清洁液中的重铬酸钾结晶会损坏吸收池的光学表面,并 应充分甩水冲洗,以防重铬酸钾吸附于吸收池表面。    4.测定前应先检查所用的溶剂在测定供试品所用的波长附近是否符合要求,可用 lcm石英吸收池盛溶剂以空气为空白(即参比光路中不放置任何物质)测定其吸收度 ,应符合规定。    5.称量应按药典规定要求。配制测定溶液时稀释转移次数应尽可能少,转移稀释 时所取容积一般应不少于5cm。含量测定供试品应称取2份,如为对照品比较法,对 照品一般也应称取2份。吸收系数检查也应称取供试品2份,平行操作,每份结果对 平均值的偏差应在±0.5%以内。作鉴别或检查可取样品1份。    6.供试品测定溶液的浓度,除各该品种项下已有注明者外,供试品溶液的吸收度 以在0.3~0.7之间为宜,吸收度读数在此范围误差较小,并应结合所用仪器吸收度线 性范围,配制合适的读数浓度。    7.选用仪器的狭缝谱带宽度应小于供试品吸收带的半宽度,否则测得的吸收度值 会偏低,狭缝宽度的选择应以减小狭缝宽度吋供试品的吸收度不挥增加为准,对于 紫外测定的部分品种,可以使用2nm缝宽,但对某些品种如青霉素钾及钠的吸收度 检查则需用lnm缝宽或更窄,否则其264nm的吸收度会偏低。    8.测定时除另有规定者外,应在规定的吸收峰±2nm处,再测几点的吸收度,以核 对供试品的吸收峰位置是否正确,并以吸收度最大的波长作为测定波长,除另有规 定外吸收度最大波长应在该品种项下规定的波长±lnm以内,否则应考虑试样的同一 性、纯度以及仪器波长的准确度    9.除另有规定外,比色法所用的空内系指用同休积的溶剂代替对照品或供试品溶 液,然后依次加入等量的相应试剂,并用同样方法处理。    10.当吸收度和浓度关系不呈线性关系时,应取数份梯度量的对照浓度,用溶剂补 充至同一休积,显色后测定各份溶液的吸收度,然后以吸收度与相应的浓度绘制标 准曲线,再根据供试品的吸收度在标准曲线上求出其含量。

标签: 紫外可见分光光度计
紫外可见分光光度计 紫外可见分光光度计使用说明_紫外可见分光光度计
  紫外可见分光光度计是由光源、单色器、吸收池、检测器和信号处理器等部件组成。光源的功能是提供足够强度的、稳定的连续光谱。紫外光区通常用氢灯或氘灯。见光区通常用钨灯或卤钨灯。单色器的功能是将光源发出的复合光分解并从中分出所需波长的单色光。
 
  色散元件有棱镜和光栅两种。可见光区的测量用玻璃吸收池,紫外光区的测量须用石英吸收池。检测器的功能是通过光电转换元件检测透过光的强度,将光信号转变成电信号。常用的光电转换元件有光电管、光电倍增管及光二极管阵列检测器。分光光度计的分类方法有多种:按光路系统可分为单光束和双光束分光光度计;按测量方式可分为单波长和双波长分光光度计;按绘制光谱图的检测方式分为分光扫描检测与二极管阵列全谱检测。
 
  仪器电源接通后,光源不亮。
 
  原因:
 
  ①光源灯泡已损坏。
 
  ②保险管烧坏。
 
  处理方法:
 
  ①更换氘灯或钨灯。
 
  ②更换保险管。
 
  紫外可见分光光度计噪音较大。
 
  原因:
 
  光源灯泡使用时间超过寿命期。
 
  处理方法:
 
  更换光源灯泡。
 
  自检时提示波长自检出错。
 
  原因:
 
  自检过程中可能打开过仪器样品室的盖子。
 
  处理方法:
 
  关上仪器样品室盖子,重新自检。
 
  仪器自检时提示通讯错误。
 
  原因:
 
  仪器与电脑之间的数据线没有连接好。
 
  处理方法:
 
  连接好数据线,重新打开仪器和软件,重新自检。
 
  仪器零点飘忽不定,主要反映在简易仪器上。
 
  原因:
 
  在简易仪器中,零点往往是通过电位器来调整,这种电位器一般是炭膜电阻制作的,使用久了往往造成接触不良。
 
  处理方法:
 
  更换电位器。
 
  在使用过程中,出现数字显示不能归零,同时伴有图线记录基线位置偏高。
 
  原因:
 
  ①光电倍增等老化,性能降低。
 
  ②信号处理板可能发生故障。
 
  ③前置放大版出现故障,引起反馈量增大
 
  处理方法:
 
  ①开机通电,先做记录故障曲线,再与原始记录的标准曲线对照,找出异同点,并作一下定性定能分析。然后用一只同型号规格的新光电倍增管替换机上的光电管,再开机实验,结果记录出来的图线并没有什么变化,由此证明光电倍增管没有老化变质。
 
  ②进一步检查信号处理板,未发现信号处理板各元器件损坏,对影响灵敏度有关的电位器检测,结果测得数据正常,这说明信号处理板没有故障。
 
  测试过程中提示能量太低。
 
  原因:
 
  ①光源灯泡使用时间超过寿命期。
 
  ②样池中有不透光的东西挡住了光。
 
  处理方法:
 
  ①更换光源灯。
 
  ②拿走挡光的物品。
 
  吸光值结果出现负值(常见)。
 
  原因:
 
  没做空白记忆、样品的吸光值小于空白参比液。
 
  处理方法:
 
  做空白记忆、调换参比液或用参比液配置样品溶液。
 
  当仪器波长固定在某个波长下时,吸光值信号上下摆动,特别是测量模式转换为按键开关式的简易仪器。
 
  原因:
 
  开关触点因长期氧化所致造成接触不良。
 
  处理方法:
 
  用金属活化剂清洗按键触点即可。
 
  样品信号重现性不良
 
  原因:
 
  排除紫外可见分光光度计本身的原因外,大的可能是样品溶液不均匀所致,在简易的单光束仪器中,样品池架一般为推拉式的,有时重复推拉不在同一个位置上。
 
  处理方法:
 
  ①采取正确的试样配置手段。
 
  ②修理推拉式样品架的定位碰珠。
 


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