振荡培养箱9大操作注意事项
振荡培养箱是一种植物,生物,微生物,遗传,病毒,医学,环保,食品,石油,化工等科研,教育和生产部门作霉菌、微生物的培养及育种试验等精密培养制备不可缺少的实验室设备。上海巴玖温馨提示用户振荡培养箱在使用过程中需要注意的事项有哪些:
1、本设备在正常运行时,箱内载物摆放应不影响空气流通,以保证箱内温度均匀。
2、在使用过程中,严禁将手指伸入上下运动的间隙中。整机严禁在阳光直射的环境中使用。
3、振荡培养箱在使用制冷时,环境温度应低于32℃,环境温度在25℃以上使用制冷时,开门次数应尽量减小。
4、插座的电气额定参数应不小于本机的电气额定参数并有良好的接地措施。
5、更换保险丝时,应将插头从插座中拔出。电线或电气设备故障后,应有专业人士修理。
6、加热物体应先在环境温度下冷却后,再放入机器内,严禁将加热物体直接放入制冷培养箱中,以防产生危险。
7、设备的搬动要平行移动,任何一方向倾斜角应小于45度。
8、箱壁内胆和设备表面要经常擦拭,以保持清洁。擦洗机器时,应先拔掉电源。
9、振荡培养箱长期不用,应拨掉电源线,以防止设备带电伤人。并应定期(一般一季度)按使用条件运行2-3天,以驱除电气部件的潮气,避免损坏有关器件。
智能光照培养箱采用先进的微电脑可编程控制方式,可设置气候箱的多项参数(温度、湿度、光照度等)来模拟自然气候;
微电脑智能液晶控制系统,温度,湿度、光照度控制精确可靠,30段程序控制,每段设置时间范围1-99小时。
双门结构双层密封,外门采用磁性胶条密封,内置超大钢化玻璃门与箱体采用硅胶条密封;
整体通透美观,方便观察箱内物品的变化而不影响温度的变化。
在使用智能光照培养箱时,应注意维护和保养:
1、培养箱外壳应可靠接地。
2、培养箱要放置在阴凉、干燥、通风良好、远离热源和日晒的地方。
放置平稳,以防震动发生噪音。
3、为保证冷凝器有效地散热,冷凝器与墙壁之间距离应大于100mm。
箱体侧面应有50mm间隙,箱体顶部至少应有300mm空间。
4、培养箱在搬运、维修、保养时,应避免碰撞,摇晃震动;倾斜度小于45度。
5、仪器突然不工作,请检查熔丝管(箱后)是否烧坏,检查供电情况。
6、本培养箱制冷工作时,不宜使箱内温度与环境温度之差大于25度。
二氧化碳培养箱是进行细胞培养的必要设备,那么在培养细胞时有哪些经验是我们可以借鉴的呢?下面让我们一起来看一下。
1、启蒙老师的重要性
一般进实验室都有师兄师姐带着做,他们就是你做细胞的启蒙老师。他们的操作手法、细节、理论讲解就成了你操作的准则,如营养液、细胞瓶的摆放位置;灭菌处理程序;开盖手法;细胞吹打手法等等。要学会他们的正确操作,在第一次的时候就要重视。
2、像养孩子一样养细胞
细胞真的很脆弱,可以每天都去看看它,以防止出现培养箱缺水、缺二氧化碳、停电、温度不够等异常现象,也好及时解决这些意外,避免重复实验带来的更大痛苦。
3、好细胞要及时保种
细胞要分批传代,这样即使有一批出了问题,还有一批备用的。像后者一般人可能不容易做到。有一次细胞污染了,全军覆没。当时可后悔没有保种。
4、每种细胞都有自己的特性
细胞跟人一样,不同的细胞,培养特性是不一样的。培养过程中要细细体会。不同细胞株使用不同的培养基和血清。
如平滑肌细胞很活跃,喜欢热闹,2~3 天就好多人口,而且不太爱吃喝,真是可以养的孩子了。内皮细胞和平滑肌细胞性格相近,不过它很不讲卫生,也很邋遢,里面有很多分泌屋,要经常换洗才行。RAW264.7 细胞也很开朗,而且很能吃,要经常喂它,头疼的是细胞很容易活化,培养它的瓶子和环境没有内毒素才好。
5、培养前的工作准备充分
包括耗材的处理、试剂的配置,无菌检验等等。
玻璃器皿的清洗。对于玻璃器皿(细胞瓶、装营养液的瓶子、小青霉素瓶等)要先用洗衣粉刷干净(注意死角),然后冲干净。用酸液浸泡 24 h 以上,之后用清水冲洗 10 遍,除去残留酸液。瓶子之类,冲洗过程要使劲摇晃。然后在双蒸水浸泡 24 h。晾干后包扎,160℃ 干烤 2 h 待用。
试剂配置。细胞培养用的液体一般使用双蒸以上的水即可。并注意 pH 值的调节。
无菌检验。主要采用过滤除菌:如胰酶、抗生素、G-418 溶液、各类培养基、丙酮酸钠、谷氨酰胺等。有些可以采用高压灭菌:如 PBS、D-Hank's等。
6、试剂分装保存
包括营养液、胰酶、血清等。
血清特别重要。血清必须贮存于 –20℃,如果一次无法用完一瓶,可将 40~50ml 分装于无菌酸处理瓶中,甚至置青霉素瓶保存。一般厂商提供的血清为无菌,不需再无菌过滤。若发现血清有许多悬浮物,则可将血清加入培养基内一起过滤,勿直接过滤血清。(一般情况下不影响细胞培养)
瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃ 冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由 –20℃ 直接至 37℃ 解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
热灭活是指 56℃,30 分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到 56℃后,将血清放入,待温度升高到 56℃ 后计时,一般 5 分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。
7、无菌意识要强
实验进行前,超净台以紫外灯照射 30 分钟灭菌,以 70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面,并开启超净工作台风扇运转数分钟后,才开始实验操作。
每次操作只处理一株细胞株,以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后,将实验物品带出工作台,以 70 % ethanol 擦拭无菌操作抬面。
无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞,必要物品,例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置,其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以 70% 乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域,一般勿在边缘区域操作。
小心取用无菌之实验物品,避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口,亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后,以手夹住瓶盖并握住瓶身,倾斜约 45° 角取用,尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。
8、选择正确的培养基
不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用 neurobase 培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。