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浅析暗视野显微镜的故障问题及对应的解决方法 显微镜解决方案

时间:2020-05-17    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     
   暗视野显微镜也叫超显微镜,常用来观察未染色的透明样品。
 
  暗视野显微镜问题及解决方法
 
  1、问题:
 
  有足够的照明,使标本可见,或标本是可见的,但很微弱。
 
  解决方案:灯电压可以被设置得太低,或灯泡可能没有足够的强度照射试样。将电压升高到大约12伏(12伏,100瓦钨卤素灯泡)或更换光源,如果可能的话,与更大的强度。如果不解决这个问题,检查台下冷凝器,以确保它正确的位置用适当大小的视场光阑。此外,还要检查颜色和/或中性密度滤光片,偏光板,相位差板,或任何其他组件,可能会降低光照强度的光路, 如果这个问题发生的高数值孔径反射式冷凝器,检查做出一定冷凝器ding级镜头正确涂油的显微镜载片上的底部。如果浸没接触已被打破,重新申请了冷凝器的油和机架,直到顶端透镜完全浸在油中和底部的滑动接触。
 
  2、问题:
 
  视场的中心降低光照强度,有一个暗点,但在外围的对象都亮起,显示正常。
 
  解决方案:台下聚光器位置不正确或光站的目标是错误的大小。小心机架冷凝器向上和向下,同时在视场中观察试样。检查做出一定的冷凝器孔径和视场光阑设置敞开位置。如果这并不影响照明,改变视场光阑尺寸使其稍大或稍小,然后重新检查照明。 偶尔出现此问题时使用过厚(大于标准一毫米)显微镜载玻片。使用千分尺或一组表卡尺来确定厚度滑动和滑动/盖玻片组合。如果滑动太厚,要么改变到正确的厚度的滑动或检查冷凝器,以确定它是否可以调整,以补偿不同厚度的幻灯片。
 
  3、问题:
 
  灯往往有一个很短的寿命,灯泡内部有涂层的黑色蒸发的钨烧结。
 
  解决方案:长时间在过高的电压,这肯定会影响其寿命的灯泡已使用。更换灯泡减少灯电压经过观察和/或试样的显微摄影。
 
  4、问题:
 
  图像有明场暗区的中心的带或不带外周。
 
  解决方案:这个问题是典型的台下冷凝器时,被错误地集中或场站太小。恢复明场,并重新建立科勒照明的条件下,再重复暗场的过程中,确保冷凝器集中。如果这没有帮助,增加视场光阑的大小,直到建立适当的暗场条件, 当使用目标具有太高的数值孔径为暗场聚光,也可能出现这个问题。如果是在目标内部的可变光阑,降低光圈开度的大小,以确定是否太多的斜光进入物镜镜头前面。此外,它可能有助于增加视场光阑的大小或改变反射的暗场聚光更高的数值孔径。
 
  5、问题:
 
  视场的外围,只有一侧是光明的。
 
  解决方案:检查物镜转换器,以确保正确地定位在显微镜的光轴的目标。有一个制动停止,正确定位目标时,应该产生积极的“咔嚓”。问题也可能发生,如果不能正确居中视场光阑。卸下目镜和相望远镜放置在眼管(或使用贝特朗镜头),然后使用定心螺丝正确对齐视场光阑。
 
  6、问题:
 
  试样图像不清晰,缺乏足够的对比度和细节。
 
  解决方案:暗视野显微镜标本可能不适合。许多染色标本没有足够的散射光,暗场条件下能清楚成像。用试样的厚度也可能是一个问题,因为非常薄的样品往往不成像以及与斜光线从暗视野冷凝器发射。这提高了标本的对比,以确定是否变更明场,相衬,DIC,霍夫曼调制对比度。
 
  7、问题:
 
  明亮区域是重点妨碍观看和/或暗场标本的显微摄影。
 
  解决方案:这可能是由于灰尘,头发,纤维,和/或污物污染的光学表面冷凝器上方的某处。彻底清洁试样滑动,光学级纸巾或棉球。有时候,这个问题的产生是由于在物镜前透镜的污染。小心松开其所在地物镜转换器的目标,慢慢转动,同时通过目镜观察样品。,如果梗阻一起旋转的目标,那么它可能是由于前透镜上的灰尘。取出的目标和滋润镜头前轻轻呼气,然后再用镜头纸或棉签包裹的长木杆。更换的目标和检查,以一定的梗阻已被完全删除。
 
  8、问题:
 
  背景是均匀的照明,但不是完全黑暗或会出现灰色的颜色。
 
  解决方案:这个问题通常发生在不透明场站太小,客观。卸下目镜和查看一个光路中的样本的情况下的目标使用一个相位望远镜或伯特兰透镜的后焦面上。整个背部焦平面应该是黑暗,没有任何出现的四周边缘,明亮的光线。如果在物镜的后焦面的光的弧或圆的观察,更改一个稍微大的视场光阑。此外,降低视场光阑的大小,将有助于抑制眩光和生产一个漆黑的背景(要小心,不要关闭此虹膜光圈太多)。
 
  9、问题:
 
  灯泡冷凝器的图像的视场部分地填充,模糊试样的详细信息。
 
  解决方案:滑动可能太薄或冷凝器可能被调得太高。厚度测量显微镜幻灯片,并进行检查,以确定油接触不破。如果遇到困难,保持幻灯片油的底部,尝试使用较厚的幻灯片。
 
  10、问题:
 
  颜色显示在背景中,或使背景光线不均与灰铸铁。
 
  解决方案:这个问题往往出现很厚,或当太多的光散射污染工件的安装介质中捕获整个坐骑。关闭视场光阑试样滑动和旋转,以找到好的方向,然后确定问题是否已得到纠正。试样被重新安装在一个较薄的安装或安装介质,可能需要进行过滤。小心地用柔软的镜头纸或棉签清洁整个显微镜载玻片和盖玻片。
 
  11、问题:
 
  当于水性坐骑,观赏水生生物标本漂在一个单一的方向不断,难以观察和显微摄影。
 
  解决方案:对流,正在建立在盖玻片的边缘,由于缓慢蒸发。将胎圈凡士林或Cytoseal的盖玻片周围介质的外周安装到显微镜载片上,牢固地密封。商业产品可用,可以加入到水中,缓慢的移动这些分钟生物体,使它们更容易拍摄。
 
  12、问题:
 
  当观看试样通过10x物镜的视场的中心,有一个长圆形的光点。
 
  解决方案:该灯冷凝器可能会错误地聚焦或扩散过滤器可能会丢失,导致图像出现在视场中的灯丝。重新聚焦聚光,并在光路中有一个扩散滤波。
 
  13、问题:
 
  视场有亮点,实现清晰对焦的标本有问题。
 
  解决方案:可能被困在小气泡与冷凝器之间的顶部和底部的显微镜载片上的油。卸下目镜(或插入一个勃氏镜)观察的目标的后焦平面上,将是可见的气泡。为了弥补,断油接触,并用棉签除去残留的气泡。清理多余的油,然后从冷凝器的前镜头和显微镜幻灯片应用干净镜头滴油。如果问题仍然存在,彻底清洁所有的光学表面,前重新申请机油。
 
  14、问题:
 
  在高放大倍率,胶体粒子显示不全的牛顿 环出现照明不均。
 
  解决方案:冷凝器可能是偏离中心。切换到低功耗的目标和中心冷凝器。请仔细检查,以确定是否在更高的功率目标具有不同的中心,如果是的话,中心的目标,以显微镜光轴。

生物显微镜的用途和使用方法

  生物显微镜是用来观察生物切片、生物细胞、细菌以及活体组织培养、流质沉淀等的观察和研究,同时可以观察其他透明或者半透明物体以及粉末、细小颗粒等物体。

  生物显微镜的用途:

  生物显微镜供医疗卫生单位、高等院校、研究所用于微生物、细胞、细菌、组织培养、悬浮体、沉淀物等的观察,可连续观察细胞、细菌等在培养液中繁殖分裂的过程等。在细胞学、寄生虫学、肿瘤学、免疫学、遗传工程学、工业微生物学、植物学等领域中应用广泛。

  生物显微镜的使用方法:

  先将低倍物镜的位置固定好,然后放置标本片,转动反光镜,调好光线,将物镜提高,向下调至看到标本,再用细调对准焦距进行观察。除少数显微镜外,聚光镜的位置都要放在最高点。如果视野中出现外界物体的图像,可以将聚光镜稍微下降,图像就可以消失。聚光镜下的虹彩光圈应调到适当的大小,以控制射入光线的量,整理增加明暗差。

标签: 生物显微镜
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显微镜的光学系统及参数

    显微镜是一种精密的光学仪器,已有300多年的发展史。自从有了显微镜,人们看到了过去看不到的许多微小生物和构成生物的基本单元——细胞。目前,不仅有能放大千余倍的光学显微镜,而且有放大几十万倍的电子显微镜,使我们对生物体的生命活动规律有了更进一步的认识。在普通中学生物教学大纲中规定的实验中,大部分要通过显微镜来完成,因此,显微镜性能的好坏是做好观察实验的关键。

    一、显微镜的光学系统

    显微镜的光学系统主要包括物镜、目镜、反光镜和聚光器四个部件。广义的说也包括照明光源、滤光器、盖玻片载玻片等。

    (一)、物镜

    物镜是决定显微镜性能的重要部件,安装在物镜转换器上,接近被观察的物体,故叫做物镜或接物镜。

    1、物镜的分类

    物镜根据使用条件的不同可分为干燥物镜和浸液物镜;其中浸液物镜又可分为水浸物镜和油浸物镜(常用放大倍数为90—100倍)。

    根据放大倍数的不同可分为低倍物镜(10倍以下)、中倍物镜(20倍左右)高倍物镜(40—65倍)。

    根据像差矫正情况,分为消色差物镜(常用,能矫正光谱中两种色光的色差的物镜)和复色差物镜(能矫正光谱中三种色光的色差的物镜,价格贵,使用少)。

    2、物镜的主要参数:

    物镜主要参数包括:放大倍数、数值孔径和工作距离。

    ①、放大倍数是指眼睛看到像的大小与对应标本大小的比值。它指的是长度的比值而不是面积的比值。例:放大倍数为100×,指的是长度是1μm的标本,放大后像的长度是100μm,要是以面积计算,则放大了10,000倍。

    显微镜的总放大倍数等于物镜和目镜放大倍数的乘积。

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