二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境,培养箱要求稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对饱和湿度(95%),来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。
二氧化碳培养箱的日常清洁:
1、清洗培养箱外壁,以消除可能进入的污垢和微生物。如果培养箱的顶部非常脏,当打开培养箱门灰尘很可能进入,所以清洁顶部是很重要的。用无绒布蘸温和的肥皂水。然后用干净的布蘸清水擦拭干净。用干净的干布擦干外面。特别要注意每个人都接触的门把手。不要使用任何液体或喷雾清洁剂清洁触摸屏显示器。而需要使用干的超细纤维布来清洁这些。
2、如果选配的培养箱具备自动消毒功能,请立即运行。在周期完成之后,用无菌蒸馏水填充储水器,并打开气阀。
3、加热培养箱,让培养箱完全干燥。这应该只需要花一点时间,所以不要让门开着——那只会重新引入新的灰尘和污物!
4、用稀释的季铵盐消毒剂擦拭内壁和部件。用70%酒精擦拭以除去任何剩余的消毒剂痕迹。再次强调,一定要擦到所有的角落,并记得安好门封条,更换内部零件。
5、用蒸馏水冲洗箱体内壁和部件,并用干净的无绒布再一次擦干。
6、取出所有隔板,隔板支架,以及所有附件、空气管道。清空水盘并用干净的无绒布擦干。
7、取出培养箱中的培养物。如果清洗时间不长,可以将其保存在干净,无菌的容器中,保持其温度。关闭培养箱,包括关闭供气阀。
水套式二氧化碳培养箱是在普通培养的基础上加以改进,主要是能加入CO2,以满足培养微生物所需的环境。主要用于组织培养和一些特殊微生物的培养。
水套式二氧化碳培养箱广泛应用于细胞、组织培养和某些特殊微生物的培养,常见于细胞动力学研究、哺乳动物细胞分泌物的收集、各种物理、化学因素的致癌或毒理效应、抗原的研究和生产、培养杂交瘤细胞生产抗体、体外授精(IVF)、干细胞、组织工程、药物筛选等研究领域。
对于细胞来说,非常理想的培养环境同样也适合这些污染物的生存,培养箱本身是不会辨别的,而细胞培养中大部分时间里细胞都是位于培养箱内,因此箱体内能否抑菌或灭菌非常关键。
水套式二氧化碳培养箱中的主要污染源:细菌、真菌(霉菌和酵母菌)、病毒、支原体、非同种细胞。
支原体:支原体污染后,因为它们不会使细胞死亡可以与细胞长期共存,培养基一般不发生浑浊,细胞无明显变化,外观上给人以正常感觉,实则细胞已经受到多方面潜在影响,如引起细胞变形,影响DNA合成,抑制细胞生长等,往往被大多数实验者忽视。
细菌:细菌污染后,培养基1-2天就会变色,对细胞生长影响明显,应迅速将污染细胞与其它细胞系隔离,灭菌后丢弃,还要用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台。
病毒:由于病毒寄生生存,爆发后尽快和正常细胞隔离,丢弃处理,相对来说容易处理,对操作者威胁较大;尽管病毒污染的细胞不影响原代培养,但生产疫苗是不安全的。因此,潜在病毒是细胞大量生产和疫苗、干扰素等生物制品制作中的难题。
真菌(霉菌和酵母菌):真菌生长的比较慢,不象细菌那么容易被发现,但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了;目前没有好的抑制方法,包括现在常用的两性霉素,一旦污染容易反复爆发,尤其孢子很难杀灭。
非同种细胞:即细胞交叉污染,由于细胞培养操作时各细胞株所需的器材和溶液没有严格分开,往往会使一种细胞被另一种细胞污染。
目前,世界上已有几十种细胞都被HeLa细胞所污染,致使许多实验宣告无效。
水套式二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境如稳定的温度(37°C)、稳定的CO2水平(5%)、恒定的酸碱度(pH值:7.2-7.4)、较高的相对湿度(95%),来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。
在生物活体内,生物体有自身的免疫系统保护细胞或组织,但是在体外培养时,没有任何保护自己的免疫屏障。对于二氧化碳培养箱的基本参数温度、CO2和湿度,大多数培养箱都能满足研究实验的需要。
然而,针对培养过程中面临的各种污染源,各品牌水套式二氧化碳培养箱的控制方式和效果不尽相同,因此细胞体外培养中最大的威胁实际上是污染问题。
二氧化碳培养箱是一种用于细胞组织,细菌培养的生化实验仪器。是开展免疫学、遗传学及生物工程研究的必备产品。适用于生命科学、免疫学、遗传学、临床医学、农业科学、药物学、医药工业、食品工业、毒理学、基础生物学研究和早期临床医学研究。
二氧化碳培养箱使用注意事项:
(1) 培养箱应由专人负责管理,操作盘上的任何开关和调节旋扭一旦固定后,不要随意扭动,以免影响箱内温度,co2、湿度的波动,同时降低机器的灵敏度。
(2) 定期检查超温安全装置,以防超温。方法为按进监测报警按扭,转动固定螺丝,直到超温报警装置响,然后关闭超温安全灯。
(3) 所加入的水必须是蒸馏水或无离子水,防止矿物质储积在水箱内产生腐蚀作用。每年必须换一次水。经常检查箱内水是否够。
(4) 如长期不使用二氧化碳时,应将co2开关关闭,防止co2调节器失灵。
(5) 所使用的co2必须的纯净的,否则降低co2传感器的灵敏度和污染co2过滤装置。
(6) 在无湿度控制的培养箱内,为保持箱内co2 的稳定,要在箱内底层放入一个盛水的容器。
(7) 箱内应定期用消毒液擦洗消毒,搁板可取出清洗消毒,防止其它微生物污染,导致实验失败。