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Diol二醇基色谱柱活动相的配制和操纵留意点 色谱柱操作规程

时间:2020-05-16    来源:仪多多仪器网    作者:仪多多商城     

Diol二醇基色谱柱有极强的化学稳定性和热稳定性。因为没有硅烷醇的作用,在对药物胺类分析时有独特的选择性,且没有拖尾现象。

 

Diol二醇基色谱柱活动相的配制:

液相色谱是样品组分在柱填料与活动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求活动相具备以下的特点:

a、活动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保存在柱中)。

b、活动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。

c、活动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用进步温度的方法降低活动相的黏度)。

 

Diol二醇基色谱柱实际操纵中应留意以下几点:

1、接头要配套,用同一厂商的组接件;

2、接头之间、柱压帽螺母与密封卡磁之间无微粒,否则收紧时轻易咬死;

3、密封卡套与柱管一次性卡紧后再也不能松动,所以拆开柱头再上紧时要小心,不能使卡套移动,原来柱真个不锈钢滤片和垫片的厚度和强度也不能改变(改变这些附件的性能就促使卡套移动);

4、接头等组接件不要拧得过紧,适当上紧后接上泵试验,分步拧紧,直到不漏为止。还有非常重要的是柱硬件的损坏往往会造成不可挽回的损失。

色谱柱的老化步骤

  色谱柱老化的目的:是彻底除去填充物中的残留溶剂和某些挥发性的物质;另一方面是促进固定液均匀牢固地分布在担体的表面上。而且新的气相色谱柱必须老化。  装填好的色谱柱,连接于仪器上后,应先试压,试漏,而后在恒定的温度下用载气吹洗数小时后承受分析,一般称此为柱子的老化过程。老化的目的是把固定相的残存溶剂,低沸点杂质,低分子量固定液等赶走,使记录器基线平直,并在老化温度下使固定液在担体表面有一个再分布过程,从而涂得更加均匀牢固。装填好的色谱柱,经过老化一段时间后,柱效及性能均稳定了,这样才可使用。  老化步骤:  1、打开氮气、氢气、空气发生器电源开关,输出压力稳定在0.4Mpa左右。  2、打开色谱仪气体净化器的氮气开关,当色谱仪载气B的柱前压上升并稳定大约5分钟后,打开色谱仪的电源开关。  3、设置各工作部温度,柱箱初始温度50℃,)进样器和检测器都是250℃。  4、待检测器温度升到100℃以上后,打开净化器上的氢气、空气开关,色谱仪的氢气稳定在0.1Mpa,空气压力为0.15Mpa左右,观察基线在氢火焰点着后的电压值应高于点火之前。  5、显示屏左下方应有蓝字显示当前的电压值和时间,待基线稳定后进样品并同时点击“启动”按钮或按一下色谱仪旁边的快捷按钮,进行色谱数据分析。分析结束时,点击“停止”按钮,数据即自动保存。  6、首先关闭氢气和空气气源,使氢火焰检测器灭火。

标签: 色谱柱
色谱柱 色谱柱的老化步骤_色谱柱

聚合物基质色谱柱的规格选择

    聚合物基质色谱柱具有相当强的硬度,有无孔和有孔两种规格。该固定相中含有苯基官能团,可与待测物发生疏水相互作用。

    与硅胶基质的反相填料相比,PolyRP固定相的一个显著优点是可以在极端pH(1-14)条件下使用,尽管分离效率略有降低。它具有相当强的硬度,有无孔和有孔两种规格。

 

    该固定相中含有苯基官能团,可与待测物发生疏水相互作用。与硅胶基质的反相填料相比,PolyRP固定相的一个显著优点是可以在极端pH(1-14)条件下使用,尽管分离效率略有降低。

    聚合物基质色谱柱的安装:

    a、拆开柱包装盒,确认色谱柱的类型、尺寸、出厂日期以及柱内贮存的溶剂。

    b、拧下柱两端接头的密封堵头放回包装盒供备用。

    c、按柱管上标示的流动相流向,将聚合物基质色谱柱的入口端通过连接管与进样阀出口相连接(如条件允许,建议在柱前使用保护柱);柱的出口与检测器连接。连接管是外径为1.57mm、内径为0.1-0.3mm的不锈钢管。

    在接管时一定要设法降低柱外死体积。连接管通过空心螺钉、压环后尽量用力插到底,然后顺时针拧紧空心螺钉,直到拧不动为止,切记不要用力过大。如聚合物基质色谱柱通过流动相加压后有漏液现象,请用扳手继续顺时针拧1/4圈,直至不漏液为止。

    聚合物基质色谱柱主要基质的特点:

    a.硅胶

    硅胶是陶瓷性质的无机物基质,刚性大,不易变形。

    化学性质较稳定,但对于水溶液尤其碱性水溶液仍然是不稳定的,即使表面经过良好的化学键合,覆盖了固定液,还是要注意水、碱性溶液、酸性溶液对硅胶的溶解作用,基质或者说是柱床(packedbed)溶解对色谱柱的影响是致命的。

    以聚合物基质色谱柱的填料构成了目前绝大多数的色谱柱填料。纯硅胶填料适宜分离溶于有机溶剂的极性、弱极性的非强离解型的化合物,硅胶也可以做凝胶色谱但柱效较低。

    聚合物基质色谱柱键合固定相的高压液相填料,有其他填料无法比拟的高分离效能。

    b.二氧化铝

    二氧化铝和硅胶相似,但对水溶液、酸性碱性水溶液溶液更加不稳定。所以,极少用作键合固定相的基质,也是适宜分离溶于有机溶剂的极性、弱极性的非强离解型的化合物,尤其是分离芳香族碳氢化合物。酸性易离解的化合物容易在二氧化铝上形成死吸附。另外,氧化铝分离几何异构体能力优于硅胶。

    c.聚合物填料

    聚合物基质色谱柱受压会变形,压力限度低但pH使用范围宽。苯乙烯-二乙烯苯基质疏水性强,使用任何流动相,在整个pH范围内稳定,可以用强酸、强碱来清洗色谱柱。甲基丙烯酸酯基质比苯乙烯-二乙烯苯疏水性更强,但可以通过适当的功能基修饰变成亲水性的。

    由于不耐压、有溶胀性,所以聚合物填料适宜用于大分子像蛋白质或合成的高聚物,另外还可以制成分子排阻、离子交换柱。大孔树脂实际上主体就是苯乙烯-二乙烯苯聚合物或类似的合成高聚物。

    聚合物基质色谱柱广泛用于各种不同基质中糖分子、糖醇和其他水溶性物质的分离。可以用来分析有机酸及利巴韦林等物质,可以用来分离树胶醛糖、阿糖醇等糖类。

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