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高效液相色谱检测器说明书

时间:2022-06-29    来源:    作者:仪多多网     

高效液相色谱仪中的检测器是三大关键部件(高压输液泵、色谱柱、检测器)之一,主要用于监测经色谱柱分离后的组分浓度的变化,并由记录仪绘出谱图来进行定性、定量分析。常用的检测器有紫外吸收检测器(UVD)、折光指数检测器(RID)、电导检测器(ECD)和荧光检测器。

一、检测器的分类

1、整体性质检测器

检测从色谱柱中流出的流动相总体物理性质的变化情况。如折光指数检测器(RID)和电导检测器(CD),它们分别测定柱后流出液总体的折射率和电导率。此类检测器测定灵敏度低,必须用双流路进行补偿测量;易受温度和流量波动的影响,造成较大的漂移和噪声;不适合于痕量分析和梯度洗脱。

2、溶质性质检测器

此类检测器只检测柱后流出液中溶质的某物理或化学性质的变化。例如,紫外吸收检测器(UVD)和荧光检测器(FD),它们分别测量溶质对紫外光的吸收和溶质在紫外光照射下发射的荧光强度。此类检测器灵敏度高,可单流路或双流路补偿测量,对流动相流量和温度变化不敏感。但不能使用对紫外线有吸收的流动相。它们可用于痕量分析和梯度洗脱。

二、按适用性分类

1、择性检测器

它对不同组成的物质响应差别极大,因此只能选择性地检测某些物质,如紫外吸收检测器、荧光检测器和电导检测器。

2、通用型检测器

它对大多数物质的响应相差不大,  几乎适用于所有物质。折光指数检测器属于通用型检测器,但它的灵敏度低,受温度影响波动大,使用时有一定局限性。

上面提到的UVD,RID,FD,ECD  4种检测器皆属于非破坏性检测器,样品流出检测器后可进行馏分收集,并可与其它检测器串联使用。对荧光检测器因测定中加入荧光试剂,其对样品会产生玷污,当串联使用时应将它放在最后检测。

三、检测器的性能指标

性能

可变波长

紫外吸收

折光指数

(示差折光)

荧光

电导

测量参数

吸光度(AU)

折光指数(RIU)

荧光强度(AU)

电导率/(μS/cm)

池体积/μL

1~10

3~10

3~20

1~3

类型

选择性

通用性

选择性

选择性

线性范围

105

104

103

104

最小检出浓度/(g/mL)

1010

107

1011

103

最小检出量

≈1ng

≈1μg

≈1pg

≈1mg

噪声(测量参数)

104

107

103

103

用于梯度洗脱

可以

不可以

可以

不可以

对流量敏感性

不敏感

敏感

不敏感

敏感

对温度敏感性

104

2%/℃

四、检测器的性能评价

在评价检测器时,要强调以下几点:

1、噪声  通常噪声是指由仪器的电器元件、温度波动、电压的线性脉沖以及其它非溶质作用产生的高频噪声和基线的无规则波动高频噪声似“绒毛”使基线变宽;短周期噪声是记录器的基线变化,呈无规则的峰或谷。噪声的存在会降低检测灵敏度,严重时使仪器无法工作。

2、基线漂移 漂移是基线的一种向上或向下的缓慢移动,可在较长时间(0.5~1.0  h)内观察到。它可掩蔽噪声和小峰。漂移与整个液相色谱系统有关,而不仅是由检测器引起的。

3、灵敏度(最小检出浓度或最小检出量)  在一个特定分离工作中,检测器是否有足够的灵敏度十分重要。当比较检测器时,常使用敏感度这一性能指标。敏感度即指信号与噪声的比值(信噪比)等于2时,在单位时间内进入检测器的溶质的浓度或质量。

4、线性范围 在进行定量分析时,希望检测器有较宽的线性范以便在一次分析中可对主要组分和痕量组分同时进行检测。

5、检测器的池体积 它应小于最早流出的死时间色谱峰的洗脱体积的1/10,否则会产生严重的柱外谱带扩展。




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